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martes, 11 de octubre de 2022

Bandeo Cromosómico

 Es de gran utilidad en la detección de deleciones, duplicaciones y otras anomalías estructurales, y facilita la identificación correcta de los cromosomas individuales.

Las bandas principales de cada cromosoma se numeran sistemáticamente: 14q32 alude la segunda banda de la tercera región del brazo largo del cromosoma 14. Las sub-bandas  se designas por números decimales detrás del número de la banda: 14q32.3 que es la tercera sub-banda de la banda 2.

Bandeo por quinacrina (bandeo Q): 1° método de tinción para producir patrones de bandeo específicos. Requiere de un microscopio de fluorescencia. No se utiliza tanto.

A-T = MAS BRILLANTES (HETEROCROMATINA)

G-C= MENOS BRILLANTES (EUCROMATINA)

Bandeo de Giemsa (bandas G): Se aplica la tinción de Giemsa o una vez que las proteínas cromosómicas están parcialmente digeridas  por la tripsina.

A-T = OSCURA (HETEROCROMATINA)

G-C = CLARA (EUCROMATINA)

Bandeo Inverso (bandeo R): requiere un termotratamiento invierte el patrón habitual blanco y negro que se observa  en las bandas G y Q. Eficaz para los extremos distales de los cromosomas.

A-T= CLARO

G-C= OSCURA

Bandas C: colorea heterocromatina constitutiva que normalmente se encuentra cerca del centrómero

Bandas NOR (Regiones Organizadas Nucleares): Se tiñen con plata, pone de relieve los satélites (reg. Satelitales), y los troncos de los cromosomas acrocéntricos.  (13-14-21-22)

Bandeo de alta resolución: En profase o al principio de la metafase, los cromosomas están más extendidos lo que aumenta el número de bandas observables (300-400 hasta 800) para todos los cromosomas. Permitiendo la detección de anomalías menos evidentes.

Hibridación Fluorescente in situ

FISH un segmento de ADN monocatenario marcado (sonda) se expone a cromosomas desnaturalizados, es posible visualizar la ubicación donde se hibrida con los cromosomas del paciente al microscopio fluorescente.

·         uso + común: determinar si una parte de un cromosoma esta suprimida en un paciente

·         ofrece una resolución considerablemente superior a la de los métodos de bandeo de alta resolución

·         Marcado con diferentes colores permite detectar anomalías numéricas (13, 18,21, X e Y)

·         Se emplea en los cromosomas en interfase (es más rápido) en la detección prenatal de anomalías cromosómicas fetales y en el reordenamiento cromosómico en células tumorales.

Cariotipo espectral (spectral Karyotyping) SKY: utiliza combinaciones de variables de cinco sondas  fluorescentes distintas en conjunción con cámaras y software de procesamiento, de manera que cada cromosoma adopta una coloración específica. Útiles para la identificación de pequeños reordenamientos cromosómicos.

Hibridación genómica comparada (CGH): Detecta pérdidas o duplicaciones de cromosomas enteros o regiones cromosómicas especificas. CGH en micromatrices (o microrrays) contiene aproximadamente 3000 sondas cromosómicas artificiales bacterianas (BAC) , ofrece una resolución superior, SE UTILIZA EN REGIONES EN LAS CUALES SE SABE QUE HASY DUPLICACIONES O DELECIONES ASOCIADAS A UNA ENFERMEDAD.

·         Altamente automático, no requiere tanto personal.

·         Basta con una cantidad diminuta de ADN para analizar el genoma entero

·         No puede detectar reordenamientos equilibrados de cromosomas (translocaciones reciprocas o inversas)